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5-26
差速離心法指分步改變離心轉速或向速崎低速離心交替進行,選用大小不向的離心力使具備不同質量、不同沉降系數的微小顆粒(粒子或大分子)從混合的懸浮液中分批沉降而進行分離的力法。該方法適用于在懸浮液中的樣品顆粒之間重量存在較大差別,更準確地說是沉降系數的差別在一個到幾個數量級的混合樣品的分離。重量或S值的差別越大,分離的效果越好。對于差別較小的顆粒,差速離心法就很難得到滿意的分離效果。這種離心方法是通過得到沉淀或得到除去大的顆粒后的上清液來進行分離、提取。該方法又稱差速沉淀法。差速沉...
5-21
研究細胞核及其組成成分,如染色質、DNA、核內小RNA以及各種復制和轉錄酶等,需分離制備細胞核。真核細胞的細胞核為有膜細胞器,所分離的細胞核要保持核膜的完整性,核內成分不外漏,核外細胞質成分不內滲或敖附在核膜上。通常用于分離細胞核的方法有3種,即有機溶劑法、蔗糖法和檸檬酸法。有機溶劑能阻止細胞質的某些成分進入細胞核內,但不能保持細胞核的正常形態,且可導致核內一些酶的失活,常用于定量分析細胞核的生化成分及其他一些特殊目的。蔗糖高速離心法較簡單,適用面廣,核純度高,保持生物活性,...
5-19
離心室常用2毫米厚的不銹鋼板制成園筒形,環繞離心室外壁四周,盤制冷施系統蒸發管,蒸發管外周有一高強度無縫鋼管防護圈,以保證安全。防護圈上下均用厚鋼板定位,上部裝有機蓋(裝甲鋼板)組成一個能密封的離心室結構。超速離心機的安全保護裝置通常包括以下四個方面:主電源過電流保護裝置,驅動回路超速保護,冷凍機超負荷保護,操作安全保護。超速離心機在超速情況下運轉時,其轉頭的離心力場很大,對轉頭的強度有嚴格的要求和標準,使用時決不允許超過轉頭的高允許轉速運行。在超速離心機的轉頭底部都裝有測速...
5-15
生物研究中,要求分離細胞、病毒、和蛋白質等,往往來用速度區帶離心或等密度離心方法。離心后,顆粒按不同大小、形狀或密度,位于不同的層次。速度區帶離心或等密度離心均需通過密度梯度進行。根據離心沉降理論,在離心力場中,各種顆粒的沉降速度。其中梯度介質的密度。因此,梯度介質在離心時起分離和支持作用。離心后,梯度介質起穩定顆粒區帶的作用,減少振動帶來的影響。密度梯度有階梯型(非連續的)、直線型、曲線型及指數型(連續的)。根據不同實驗目的選擇不同類型的梯度。階梯型梯度多用于時間較短的差速...
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轉頭是離心機的重要配件之一。由于工作時的轉速很高,相應的離心力場便很大,所以離心轉頭均用高強度的鋁合金、鈦合金及超硬鋁、鍛鋁制成。1.角度轉頭這類轉頭放置離心管的孔與轉頭軸線都具有14°~40°的傾斜角度,一般20°~30°的居多。其管孔的傾斜度越小,離心管頂與管底所受到的離心力差也越小。這類轉頭適用于做差速離心。也可用于密度梯度離心,但效果差一些。2.甩平轉頭這一類轉頭有可活動的離心吊桶,桶內放入離心管后懸掛在轉頭的銷釘上。離心時,由于銷釘要承受用頓對它的很大拉力,因此離心...
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高速、超速(冷凍)離心機的高轉速分別為10000-20000r/min及50000-90000r/min大離心力(R、C、F)在60000g左右。能使亞細胞器分級分離,并可用于到定蛋白質及的分子量。這類離心機的結構通常由轉動裝置、速度控制系統、溫度控制系統、真空系統、離心室、離心轉頭等部分組成,其主要部件分別介紹如下:轉動裝置超速離心機的驅動方式較多,員常見的有如下幾種:(1)高速電機——齒輪加速大多數超速離心機的驅動裝置是出水冷電動機作為動力,通過齒輪箱的齒輪變速得到幾萬轉...
5-5
普通離心機由電動機、轉盤、調速器、套管與底座組成,電動機是離心機的主體,常見的是串激電動機,它包括定子和轉子兩部分。定子由機座、定子鐵芯和磁場繞組組成。定子鐵芯的內壁有兩個突出部分,磁場繞組即繞在兩個突出的鐵芯上,當兩個繞組通有電流時即構成兩個集中式磁。轉子由轉子鐵芯、轉子繞組、整流子和轉軸組成。轉子鐵芯固定在轉軸上,鐵芯外壁有許多直的(或斜的)槽口,檀口內嵌入線圈,每組線圈兩端的引出線分別接在相鄰的兩個整流片上。整流子由許多塊互相絕緣的鋼片組成,每塊鋼片都與相鄰的兩組線圈連...
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